Vad är en ultracentrifug?
En ultracentrifug är den mest kraftfulla typen av laboratoriecentrifug och används för att separera partiklar på molekylär och subcellulär nivå. Med varvtal över 100 000 rpm och relativ centrifugalkraft (RCF) över 800 000 g kan den pelletera partiklar som är alldeles för små för en vanlig bordscentrifug - exempelvis virus, ribosomer, membranvesiklar och lösliga makromolekyler.
För att nå dessa hastigheter arbetar rotorn i en vakuumkammare som eliminerar luftmotstånd och friktionsvärme, kombinerat med aktiv kylning som skyddar värmekänsliga biologiska prover.
Vanliga tillämpningar
- Proteinseparation och rening av makromolekyler
- Virusrening och koncentrering av viruspartiklar
- Subcellulär fraktionering - isolering av mitokondrier, mikrosomer och membran
- Densitetsgradientcentrifugering för separation efter täthet
Preparativ och analytisk
En preparativ ultracentrifug isolerar och samlar in material för vidare användning, medan en analytisk ultracentrifug mäter provets sedimentationsegenskaper i realtid. De flesta laboratorier använder preparativa modeller för rening och fraktionering.
Rotortyper
Rotorvalet avgör både separationsmetod och kapacitet:
| Rotortyp | Princip | Typisk användning |
|---|---|---|
| Fast vinkel | Rören i fast lutning | Pelletering, snabb sedimentation |
| Sving-ut | Rören svänger ut horisontellt | Densitetsgradient, zonseparation |
| Vertikal | Rören står vertikalt | Snabb gradientseparation, plasmid-DNA |
RCF eller RPM?
Vid ultracentrifugering är det särskilt viktigt att ange RCF (g) i stället för enbart RPM. Eftersom g-kraften beror på rotorns radie ger samma varvtal helt olika separationskraft i olika rotorer. Protokoll för densitetsgradienter och sedimentation specificeras alltid i g för reproducerbara resultat.
Densitetsgradientcentrifugering
Genom att låta provet vandra genom en gradient (till exempel sackaros eller CsCl) separeras partiklar efter sin densitet i distinkta band. Metoden är central för virusrening och för att isolera rena subcellulära fraktioner.
Så väljer du rätt ultracentrifug
Avgörande faktorer är maximalt varvtal och g-kraft, tillgängliga rotorer, provvolym samt kylningens temperaturområde. Rätt kombination beror på om ni främst pelleterar, kör gradienter eller fraktionerar celler.
Begär en kostnadsfri offert så hjälper vi er att välja ultracentrifug och rotorer som matchar era tillämpningar och provvolymer.